水貂肠炎细小病毒毒株分型及高免疫原性毒株选育_农业科学
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水貂肠炎细小病毒毒株分型及高免疫原性毒株选育

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  • 主要完成单位:农业科学特产研究所
  • 主要完成人员:吴威,王克坚,聂金珍,程世鹏,吴育林,王宝东,王汉金
  • 起  止  时  间 :1990年5月—1995年12月
  • 获  奖  情  况 :1996年吉林省科技进步奖二等奖
  • 内  容  提  要 :
  

水貂肠炎细小病毒病是水貂三大传染病之一,近几年,研制出多种疫苗,但仍存在免疫失败的现象。造成我国疫苗免疫失败的原因是否因病毒型的差异,尚无人报道。据此,我们承担吉林省青年科学基金项目“水貂肠炎细小病毒分型及高免疫原性毒株选育”主要完成了以下几个内容。
  1.水貂肠炎细小病毒单克隆抗体的建立:用提纯的肠炎细小病毒免疫Balb/c小鼠,待小鼠转为阳性,取脾细胞与NS:骨髓瘤细胞融合,经3次克隆获得8株分泌抗MEV的单克隆抗体杂交瘤细胞株。
  2.水貂肠炎细小病毒的分离鉴定:几年来我们从全国各地发生水貂病毒性肠炎的饲养场,取病貂肝脾、淋巴结,进行大量体外培养经努力在几个省分离到体外生长良好的8株水貂肠炎细小病毒。
  3.水貂肠炎细小病毒分型:用研制的单克隆抗体和美国引进抗A型猫泛白细胞减少症单抗,通过免疫组化法对分离的8株肠炎细小病毒进行分型鉴定,其结果证明我国流行有肠炎细小病毒为“B”型。
  4.制苗毒株的选育:在病毒分离和分型的基础上,筛选出“吉MEV”进行驯化培养,经培养该毒株在体外生长良好。经各项试验证明,该毒株具有良好的免疫原性,毒力稳定,并命名为"MEVB"做为制苗毒株。
  5.疫苗研制:在上述研究的基础上,开展疫苗研究,经过努力研制成功水貂肠炎细小病毒灭活疫苗,该苗免疫期6个月,保护率100%,保存期为半年,并具有安全可靠,无毒副作用,免疫原性强等优点,六年共生产127批470万ml疫苗,全部应用现场,免疫水貂200多万只,狐、貉近在万只。经六年现场观察和广大用户反应该苗的免疫原性好,几年来从未发生免疫失败现象,受到了用户欢迎,仅疫苗获利200多万元,饲养场减少经济损失4000多万元,取得了巨大经济效益和社会效益。   
  综上所述,本项研究集基础研究、应用研究和开展研究为一体体现了基础研究指导应用和开发研究的规律,在单抗研制,毒株分型及选育方面达到国际领先水平,研制的疫苗处国内领先水平,达到国际同类研究水平。该项成果具有广泛的应用前景。

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