高产菊粉酶酵母与菊粉高果糖浆制备技术
- 主要完成单位:农业科学饲料研究所
- 主要完成人员:王建华,王明华,张帆,腾达,秦玉昌,刘艳艳,姚怡,何平,杨雅麟
- 起 止 时 间 :1997年5月—2002年12月
- 获 奖 情 况 :2004年北京市科学技术进步奖二等奖
- 内 容 提 要 :
本成果包括高产菊粉酶酵母菌筛选、发酵和酶法生产菊粉果糖技术。
1、筛选到一株高产菊粉酶克鲁维酵母菌Kluyveromyces marxianus IW9801,已注册专利保藏(CGMCC0360);
2、采用高密度细胞发酵和菊粉诱导相结合的新调控措施,最高菊粉酶活性水平达289U/mL(发酵液),比20世纪90年代国际报道克鲁维酵母菊粉酶最高值高6.8倍,解决了菊粉果糖产业化技术瓶颈。
3、酶的菊粉酶/转化酶活性比1/24.72; Km(菊糖)=13.3mMol/L, Km(蔗糖)=62.6mMol/L; 最适反应pH4.4;最适反应温度55℃,50℃下酶半衰期16h;首次发现外加Mg2+可提高酶活11.28%。
4、克隆的菊粉外切酶基因全长1599bp,编码533氨基酸,酶MW59.2kD。编码氨基酸序列上有10个潜在N-糖基化位点。其基因G+Cmo147.3%。
5、建立了产酶发酵、酶解菊粉和菊芋汁生产菊粉果糖小、中试工艺和试生产线,只一步酶反应,工序简单,成本低;底物水解率大于95%。产物果糖含量大于90%。
6、成果推动北京和全国菊粉产业发展;研发的新型功能甜味剂有利于改善市民食品结构和健康水平;菊芋作用新糖料作物和固沙植物推广有利于调整京郊作物结构、推动北京和西、北部生态及三农问题解决。
7、经专利初审、实审、公开、授权、查新、鉴定和引文证明产酶发酵和酶法制糖关键技术指标达国际领先水平。2003年获专利授权ZL98120697.2确认专利权22条;2002年获国家重点新产品证书2002ED326016;引文给予本成果“远远高于国内外水平”和“重大突破”评价(罗明典,2003;周帼萍,2001);CA和Medline收录本成果论文和专利5篇次;2002年应邀到9届欧洲菊粉培训班介绍本成果。
8、推广应用试产品8.4吨增效19.66万元,测算产业化后增效1.67亿元。