基于mtDNA茸鹿系列产品检测技术的研究与应用
- 主要完成单位:国农业科学院特产研究所
- 主要完成人员:邢秀梅,苏伟林,徐佳萍,吴琼,杨福合,齐俊生,荣敏
- 起 止 时 间 :2010年1月—2011年12月
- 获 奖 情 况 :2013年吉林省科技进步奖三等奖
- 内 容 提 要 :
项目针对制约鹿产业发展中的技术难题,围绕鹿科动物线粒体全基因组序列测定、鹿产品单重和多重PCR检测技术体系建立、DNA条形码评估等进行了系统的研究,探讨了鹿产品来源的种属特异性和品种间特异性,弥补了传统检测方法的不足,为鹿产品的精确检测提供了可靠途径。完成的主要技术经济指标如下。
(1)测定了兴凯湖梅花鹿、敖东梅花鹿、东丰梅花鹿、四平梅花鹿、东北马鹿、塔里木马鹿14个个体的线粒体全基因组序列,分析了线粒体基因结构。将部分序列递交到GENBANK(美国国家生物技术信息中的DNA序列数据库)上。
(2)改进了传统抗凝血DNA提取方法,建立了一种环保、快速、成本低廉DNA提取方法。
(3)建立了梅花鹿、马鹿、赤鹿、驯鹿、塔里木马鹿、水鹿、猪、牛、羊、鸡10套单重PCR检测方法;建立了2套Multiplex PCR检测方法,从鹿科动物和常见家养动物两个方面对各类鹿产品进行检测。
(4)测定了194只敖东、东丰、四平和兴凯湖梅花鹿cytb基因1 032bp序列,共发现23个变异位点,8个单倍型。四平梅花鹿品种中的个体均是后来进化而来的种群,而敖东梅花鹿、东丰梅花鹿和兴凯湖梅花鹿品种中的一部分个体是最原始的,部分个体是进化而来的。
(5)测定了180只敖东、东丰和四平梅花鹿的COⅠ基因和COⅡ基因序列,筛选到敖东梅花鹿品种特异突变位点,探索了DNA条形码在梅花鹿品种评估的可行性和有效性。
(6)检测了市场上购买的鹿茸、鹿胎、鹿鞭、鹿筋、鹿尾、鹿血等产品,伪品检出率分别为79%、83%、100%、57%、285%、57%。
(7)发表论文10篇,其中SCI收录3篇,申报发明专利7项。
研制的鹿源性、马鹿、驯鹿、塔里木马鹿、水鹿、鹿产品的PCR检测等6个试剂盒,在吉林、黑龙江、辽宁等省区的鹿产品质量鉴定部门、销售市场和制药企业示范推广,累计检测304 350个样品,直接经济效益85218万元,间接效益6 40067万元。