本项研究采用病原生物学、生物制品学和分子生物学技术开展了牛源致病性坏死梭杆菌和节瘤拟杆菌的研究，通过项目攻关，采用常规厌氧菌分离方法分离了4株牛源坏死梭杆菌，对分离菌株进行了分子生物学鉴定；建立了白细胞毒素启动子区亚型的鉴定方法；利用高效发酵培养技术，筛选出适应产业化生产的利用国内原料的专用坏死杆菌液体培养基；建立了以牛、羊腐蹄病的主要病原节瘤拟杆菌的DNA检测为基础的高度敏感性和特异性诊断方法；以分离的坏死梭杆菌F4株基因组为模板，PCR扩增了坏死梭杆菌白细胞毒素基因（lktA）的BSBSE和SH基因片段，构建了原核表达质粒，检测目的蛋白具有反应活性；构建了坏死梭杆菌白细胞毒素基因的BSBSE片段和SH片段融合基因原核表达质粒，实现了BSBSE和SH融合表达，检测融合蛋白具有反应活性；利用分离菌株制备的灭活疫苗进行了疫苗的免疫推广，使发病率由原来的15%下降到3%以下，有效地控制了腐蹄病的发生。