本研究首次利用RT-PCR方法扩增H5N1亚型禽流感病毒早期分离株的HA和NA基因，以高度成熟安全的禽痘病毒疫苗株S-FPV-017为载体构建含有这两种基因的重组转移载体，利用脂质体转染，蓝白斑筛选获得表达HA和NA基因的重组禽痘病毒(rFPV-HA-NA)。经多轮蚀斑纯化，PCR，Western-blot分析表明，重组禽痘病毒rFPV-HA-NA可高效表达AIV的HA和NA蛋白；经细胞连续传代，确证了重组病毒具有良好的遗传稳定性，在基因水平及免疫效力方面不会发生改变。动物试验结果表明，该重组疫苗的最小免疫剂量为100个蚀斑形成单位(PFU)，以一个免疫剂量(2000PFU)的疫苗经翅下刺种SPF鸡及商品鸡，一周后可诱导产生HI抗体，2周后HI抗体达到5log2以上，保护性抗体(4log2以上)可持续6个月以上。免疫后9个月内，对100CLD5。的H5N1亚型高致病性禽流感病毒攻击均可提供100％的保护。该基因工程疫苗抗原针对性强，免疫接种后不产生琼脂扩散(AGP)抗体，不影响疫情监测，具有高效，安全，免疫效力产生快，免疫保护期长及免疫接种成本低等优点。可广泛用于预防由H5亚型禽流感病毒引起的禽流感，有效防止高致病性禽流感在禽群中的大面积暴发和传入人群而导致人类流感的大暴发。