禽流感病毒RT-PCR检测技术研究与应用
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发布时间:2015-03-25
- 主要完成单位:农业科学哈尔滨兽医研究所
- 主要完成人员:王秀荣,陈化兰,于康震,李雁冰,乔传玲,刘丽玲,包红梅
- 起 止 时 间 :2001年6月—2004年6月
- 获 奖 情 况 :2006年黑龙江省科技进步奖二等奖
- 内 容 提 要 :
本研究依据我国禽流感流行情况,结合国内该病毒的遗传演化规律,在HA基因全片段范围内设计多对引物,通过分析、比较现地流行毒株的覆盖情况,确定适合于我国禽流感流行毒株的RT-PCR引物,建立H5、 H7、 H9、N1、N2亚型RT - PCR方法;针对家禽中流行较为广泛、危害相对大的Nl、 N2亚型神经氨酸酶基因建立一种RT-PCR鉴别方法,建立Nl、 N2神经氨酸酶亚型鉴别RT-PCR方法;进一步扩展建立了以M基因为参照的A型流感病毒RT - PCR方法;并且在国内首次应用Multi - RT-PCR 技术检测H5亚型禽流感病毒。在对RT 一 PCR工作体系迸行了大量实验室研究工作的基础上,根据目前现地流行的禽流感病毒以H5 亚型为主,组装了 H5 亚型和A型流感通用的两种禽流感RT-PCR检测试剂盒,在全国推广应用,效果良好,该方法敏感、特异,是一种快速的病原学诊断方法,适应实际生产的需要。本成果禽流感病毒 RT-PCR试验方法现已通过农业行业标准认证,编号为NT/T 772 -2004;研制的禽流感RT-PCR诊断试剂盒被农业部列入《全国高致病性禽流感监测计划(试行)》禽流感病原学监测专用诊断试剂盒。禽流感病毒RT - PCR诊断技术及诊断试剂盒填补了国内外禽流感各亚型病原学诊断的空白,为我国禽流感的综合防制提供了先进、有效的早期快速诊断技术,达到国内领先、国际先进水平。