本研究采用流感病毒反向遗传学技术克隆了禽源高产流感病毒A/Goose/Dalian/3/ 01 (H9N2)的全部内部基因片段，构建了相应的转录/表达载体；克隆了近期流行的H5N1亚型高致病性禽流感病毒代表株A/Goose/QFY/HLJ/04 (H5N1)的HA基因以及 N3亚型标准参考株A/Dnck/Germany/1215/73 ( H2N3 )神经氨酸酶基因，构建了相应 的转录/表达载体；通过脂质体介导转染细胞，完成了由质粒拯救出抗原匹配性好、安全、高产、低毒、带分子标记的重组禽流感疫苗株rgH5N3，该疫苗株不但可以在鸡胚中大量增值，而且也能够在组织培养细胞中大量增值，细胞培养上清液中的病毒血凝单位可以达到1 ：1024，病毒效价是一般毒株的4—8倍。由其制备的油乳剂灭活疫苗对鸡、鸭、鹅等家禽具有良好免疫保护效果和安全性并且能够进行H5N1亚型野毒感染和疫苗免疫家禽的鉴别诊断。