黄曲霉毒素高灵敏检测技术研究与应用
- 主要完成单位:农业科学油料作物研究所,北京华夏科创仪器技术有限公司,农业部科技发展中心,上海优你生物科技股份有限公司
- 主要完成人员:李培武,张奇,丁小霞,张文,姜俊,崔野韩,张新民
- 起 止 时 间 :1999年3月—2011年11月
- 获 奖 情 况 :2013年农业科学科学技术成果奖一等奖
- 内 容 提 要 :
(1)主要技术内容与技术经济指标。
黄曲霉毒素是迄今毒性最强的真菌毒素,对农产品食品污染范围广、危害重。针对黄曲霉毒素免疫原性差、抗体亲和力低、交叉反应强,原有检测技术灵敏度低,不能满足高灵敏现场检测需求,长期威胁农产品、食品及饲料消费安全与国际贸易的重大技术难题,经连续15年系统研究,发明了系列黄曲霉毒素高灵敏、高特异性单克隆抗体,建立了具自主知识产权的黄曲霉毒素高灵敏检测技术,并研发出系统配套的黄曲霉毒素检测仪,实现了从技术源头创新、到终端产品创新与应用的全程创新。
第一,发明了黄曲霉毒素高灵敏通用及特异性1C11、2C9等单克隆抗体细胞株,抗体灵敏度最高。
创建了黄曲霉毒素杂交瘤细胞株半固体培养基梯度两步筛选法和黄曲霉毒素阳性噬菌体展示抗体库,发明了黄曲霉毒素高灵敏和高特异性1C11、2C9、3G1、1C8等系列抗体细胞株,IC50分别达0.001~0.018纳克/毫升、1.6纳克/毫升、0.067纳克/毫升、13.92纳克/毫升,灵敏度最高,特异性最强。
第二,建立了黄曲霉毒素总量和M1、B1和G1分量高灵敏、高特异性系列检测技术。
研究建立了拥有完全自主知识产权的黄曲霉毒素总量和M1、B1分量系统配套流动滞后免疫层析检测技术、流动滞后免疫时间分辨荧光检测技术及免疫亲和荧光检测技术,比国内外同类检测方法灵敏度提高了10~50倍,攻克了长期困扰农产品、食品及饲料等黄曲霉毒素高灵敏现场检测技术难题。
第三,研制出系统配套的黄曲霉毒素免疫亲和微柱、试剂盒及检测仪器。
实现了技术转化和产品创新,研制出系列配套的黄曲霉毒素总量及M1、B1分量高灵敏、高特异性检测试剂盒、免疫亲和微柱以及黄曲霉毒素免疫亲和荧光检测仪、单光谱成像检测仪和流动滞后免疫时间分辨荧光检测仪,灵敏度达0.003~0.1纳克/毫升,打破了国外对中国黄曲霉毒素高灵敏检测产品的垄断和制约,显着提升了中国农产品与食品检测仪器设备的自主装备能力,实现了从技术源头创新到最终产品创新与应用的全程创新。
(2)推广应用与效益情况
已广泛应用在农产品(花生、稻米等)、食用油(花生油、玉米油等)、调味品(花生酱等)、乳制品(鲜牛奶等)和饲料生产等质量安全控制与检测中,并在英国利兹大学、德国慕尼黑理工大学及北京大学等国内外知名科研机构以及风险监测与政府监管等环节得到推广应用。近3年获直接经济效益:新增利润7 344.6万元,新增利税1 662.2万元;间接经济效益:新增产值181.3亿元,税收21.3亿元。
(3)知识产权情况
拥有完全自主知识产权,已获专利授权18项,包括国家发明专利14项,实用新型专利4项,全部实施技术转化;研制并审定农业行业标准8项,出版英文着作(合着)2部,发表论文63篇,其中SCI论文25篇,其中,SCI一区TOP论文5篇,IF(影响因子)大于5.0有8篇。