日本血吸虫生长发育相关基因的筛选,分析及功能研究
- 主要完成单位:农业科学上海兽医研究所
- 主要完成人员:林矫矫,冯新港,程国锋,苑纯秀,傅志强,刘金明,石耀军,金由辛,蔡幼民,周元聪,金亚美,姚利晓,朱传刚,陆珂,李浩,夏艳勋,孙安国,陶丽红,赵晓宇,张慧,杨柳
- 起 止 时 间 :2002年1月—2006年12月
- 获 奖 情 况 :2008年农业科学科学技术成果二等奖
- 内 容 提 要 :
经分析发现一批基因和蛋白在日本血吸虫不同发育阶段及雌,雄虫不同性别虫体呈差异表达。获得了272个日本血吸虫期别和297个血吸虫性别差异表达基因信息及93个日本血吸虫差异表达蛋白信息,其中新发现基因(EST)38个。深入开展血吸虫抗原基因功能研究,克隆了23个含ORF的血吸虫抗原基因,其中SjGCP,SjTSP2,SjTEGF,Sj314C10,SjIF5,Sj423,SjWnt4和Sj21.7等8个基因为首次报道,应用家蚕细胞和酵母表达了3个新基因,构建了3种含目的基因的DNA疫苗。在小鼠和绵羊等动物10多批基因工程和多价疫苗免疫试验基础上,开展了血吸虫天然宿主水牛免疫试验,初步试验结果表明,研制的三价重组抗原苗和单价基因重组抗原苗分别诱导了73.84%和50.15%的减虫率及84.34%和55.99%的粪便孵化毛蚴减少率,提示这两种疫苗都有很大的研究潜力和发展潜力。
应用RNAi技术在体内外试验发现,日本血吸虫雄虫差异表达基因SjGCP的表达状况影响了血吸虫雌雄虫的合抱。首次在国内外明确某种基因可影响血吸虫雌雄虫的合抱,首次在动物体内实现利用RNAi技术成功干扰血吸虫基因功能。
本研究结果为揭示血吸虫的生长发育机制,研制开发抗血吸虫病疫苗和新治疗药物,开拓血吸虫病防治新途径提供了重要基础,具有重要的理论意义和实际意义。采用的技术方法和策略已被在国内相关实验室借鉴应用于球虫,猪蛔虫等重要寄生虫的功能基因组学研究。分离,鉴定的一些重要血吸虫功能基因或蛋白,已被应用于开展生物学功能的深入研究,包括评估其作为血吸虫候选疫苗或药物靶标的潜力。