毛皮动物犬瘟热病毒分子流行病学调查及防控关键技术研究与应用
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发布时间:2016-08-18
- 主要完成单位:农业科学特产研究所,吉林特研生物技术有限责任公司
- 主要完成人员:闫喜军,程世鹏,赵建军,吴威,张海玲,白雪,张蕾,胡博,柴秀丽,赵传芳,罗国良,易立,王凤雪,刘昊,司方方
- 起 止 时 间 :2005—2013年
- 获 奖 情 况 :2014年农业科学科学技术成果奖一等奖
- 内 容 提 要 :
(1)通过对我国近10年不同地域毛皮动物(水貂、狐狸、貉)犬瘟热病毒(Canine distemper virus,CDV)血凝素基因(H)克隆及序列分析,在国内首次系统地完成了我国毛皮动物CDV分子流行病学调查工作,澄清了我国毛皮动物CDV基因分型情况及其在时间、地域上的遗传变异规律,为了解我国CDV流行动态及疫情预警提供了理论依据。
(2)基于CDV不同靶基因(N和H基因),分别建立了RT-PCR-限制性酶切片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)和联合RT-PCR两种CDV疫苗株和野毒株鉴别检测技术,为犬瘟热的快速诊断提供了有效的手段。
(3)在国内外首次克隆了CDV感染水貂、狐狸、貉的受体——信号淋巴细胞激活分子(SLAM),并建立了稳定表达SLAM的Vero细胞系(Vero-rSLAM),应用该细胞系成功培育了CDV强毒株HBF-1株;该细胞系的建立解决了CDV强毒分离的技术难题。
(4)采用蚀斑克隆技术从CDV鸡胚成纤维细胞适应株CDV3株中成功克隆驯化出1株免疫原性良好的Vero细胞适应株(CDV3-CL株),并研制了安全、有效的犬瘟热Vero细胞活疫苗;完成了临床试验和注册申报,获得了新兽药注册证书。
(5)建立了犬瘟热Vero细胞活疫苗规模化生产工艺,实现疫苗产业化生产;产品进行了有效地转化和推广,推广面积50%以上;养殖单位应用疫苗后犬瘟热发病率明显降低。
(2)基于CDV不同靶基因(N和H基因),分别建立了RT-PCR-限制性酶切片段长度多态性分析(RT-PCR-RFLP)和联合RT-PCR两种CDV疫苗株和野毒株鉴别检测技术,为犬瘟热的快速诊断提供了有效的手段。
(3)在国内外首次克隆了CDV感染水貂、狐狸、貉的受体——信号淋巴细胞激活分子(SLAM),并建立了稳定表达SLAM的Vero细胞系(Vero-rSLAM),应用该细胞系成功培育了CDV强毒株HBF-1株;该细胞系的建立解决了CDV强毒分离的技术难题。
(4)采用蚀斑克隆技术从CDV鸡胚成纤维细胞适应株CDV3株中成功克隆驯化出1株免疫原性良好的Vero细胞适应株(CDV3-CL株),并研制了安全、有效的犬瘟热Vero细胞活疫苗;完成了临床试验和注册申报,获得了新兽药注册证书。
(5)建立了犬瘟热Vero细胞活疫苗规模化生产工艺,实现疫苗产业化生产;产品进行了有效地转化和推广,推广面积50%以上;养殖单位应用疫苗后犬瘟热发病率明显降低。